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          固氮菌肥料行業標準

          (發布日期:2007-5-23 10:24:02)
          瀏覽人數:
          標準類別:NY-行業標準(農業)

            關鍵詞:固氮菌肥料

            標準號:NY411—2000

            標準名稱:固氮菌肥料*

            標準分類:農業土壤化肥標準

            頒布部門:

            頒布日期:

            實施日期:

            ========================================================

            1范圍

            本標準規定了固氮菌肥料產品的分類、技術要求、檢驗方法、檢驗規則、包裝、標識、運輸、貯存等。

            本標準適用于含有益的固氮菌、能在土壤和多種作物根際中固定空氣中的氮氣,供作物氮素營養,又能分泌激素刺激作物生長的活體制品。本標準也適用于以固氮菌為主的含有能促進固氮、生長的植物促生根際細菌(PGPR)的復合固氮菌肥料。

            2引用標準

            下列標準所包含的條文,通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時,所示版本均為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。

            GB/T625—1989化學試劑硫酸

            GB/T629—1997化學試劑氫氧化鈉

            GB/T1250—1989極限數值的表示方法和判定方法

            GB/T6543—1986瓦楞紙箱

            GB/T6682—1992分析實驗室用水規格和試驗方法

            3定義

            本標準采用下列定義。

            31自生固氮菌

            在土壤里能固定空氣中的氮,供作物氮素營養,又能分泌激素刺激作物生長的微生物。

            32根際聯合固氮菌

            既依賴根際環境生長,又在根際中固定空氣中的氮氣,對作物的生長發育產生積極作用的微生物。

            33固氮效能

            固氮菌每消耗1g碳水化合物(糖)從空氣中攝取氮素的毫克數,固氮效能用mg氮/g糖表示。

            4產品分類

            41按劑型不同分為液體固氮菌肥料、固體固氮菌肥料和凍干固氮菌肥料。

            42按菌種及特性分為自生固氮菌肥料、根際聯合固氮菌肥料、復合固氮菌肥料。

            5技術要求

            51菌種

            在含一種有機碳源的無氮培養基中能固定分子氮,并具有一定的固氮效能。菌體一般為短桿狀(固氮螺菌屬菌體呈螺旋狀),革蘭氏染色陰性。

            511自生固氮菌

            用固氮菌屬(Azotobacter)、氮單胞菌屬(Azomonas)的菌種,也可用莖瘤根瘤菌(Azorhizobiumcaulinodans)和固氮芽胞桿菌(Paenibacillusazotofixans)菌株。

            512根際聯合固氮菌

            可用下列菌種固氮螺旋菌(Azospirillum);陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)經鑒定為非致病菌的菌株;糞產堿菌(Alcaligenesfaecalis)經鑒定為非致病菌的菌株;肺炎克氏桿菌(Klebsiellapneumoniae)經鑒定為非致病菌的菌株。

            使用本準則規定之外的菌種生產固氮菌肥料時,菌種必須經過鑒定,并符合51要求。

            生產固氮微生物肥料所使用的菌種,必要時還要進行菌種染色鑒別(見附錄B)和菌種固氮效能測定(見附錄C)。

            52成品技術指標(見表1)

            表1成品技術指標

            指標劑型:液體固體凍干

            項目:乳白或淡褐色液體,黑褐色或褐色粉狀,

            外觀、氣味混濁,稍有沉淀,無濕潤、松散,無異臭乳白色結晶,無味

            異臭味味

            水分,%—250!35030

            pH值55!7060!7560!75

            細度,過孔徑018mm標準篩5200

            的篩余物,%#

            有效活菌數,個/mL(個/g、個/501081010850108瓶)$

            雜菌率1),%$5015020

            有效期,2),月#3612

            1)其中包括10-6馬丁培養基平板上無霉菌。

            2)此項僅在監督部門或仲裁檢驗雙方認為有必要時才檢測。

            6抽樣

            按每一發酵罐菌液制成的產品為一批,逐批抽樣檢驗。抽樣過程要嚴格避免雜菌污染。

            61抽樣工具及用品

            抽樣前預先準備好無菌塑料袋(或塑料瓶)、金屬勺、剪刀、封口機、牛皮紙封樣袋、標簽、抽樣封條和膠水。

            62抽樣數量及抽樣方法

            在成品庫抽樣,可按''形分層設點抽取,抽樣以件為單位,小包裝產品以一包裝箱為一件。大包裝(30!50kg)產品以一袋(或一桶)為一件。抽樣件數由樣品基數的大小確定。1!10件,全部抽樣;11!200件,抽樣10件;201!400件,抽取20件;樣品基數大于

            400件者,按超過部分的2%增加抽樣件數,但總件數不要超過40件。

            每件包裝產品抽取一小袋,在無菌條件下每袋取樣200g。然后將所有樣品混勻,按四分法縮到2000g,分裝4袋,然后封口。每2袋為一份裝入牛皮紙封樣袋。

            液體產品每件吸取10mL,一同放入無菌的三角瓶中,混勻后分成兩份,每份250mL。凍干產品,每件取一支放入無菌的三角瓶中,加無菌液體培養液,溶解混勻后分成兩份,每

            份50mL。貼上標簽和封條(一份被抽樣單位留存,一份交檢測中心檢測)。

            7檢驗方法

            71儀器設備及試劑

            711儀器設備

            生物顯微鏡(10100);菌落計數器;恒溫培養箱;恒溫干燥箱,恒溫搖床;滅菌鍋;無菌室或超凈工作臺;酸度計;試管%15mm150mm,%18mm180mm;培養皿直徑9cm; 三角瓶500mL;無菌吸管05、1、5、10mL;玻璃刮刀;濾紙;酒精燈;標準篩孔徑018mm和015mm;1號羊毛畫筆;無菌水;無離子水。712試劑選擇培養基(見附錄A);剛果紅染液(05%)。

            72成品檢驗

            721氣味檢驗

            取固氮菌肥料樣品打開包裝,進行感觀檢驗。

            722外觀檢驗

            將固體固氮菌肥料包裝打開,裝在白色搪瓷盤中,將液體固氮菌肥料搖勻,在明亮光線下進行感觀檢驗。

            723pH值測定

            液體固氮菌肥料的pH值測定:取供檢菌液直接測定pH值,取三次測定結果的平均數。固體固氮菌肥料的pH值測定:取50mL燒杯一個,加入菌肥25g,無離子水25mL。通過磁力攪拌器使溶液均勻后用酸度計測定pH值。取三次測定結果的平均數。

            724含水量測定

            稱取固體固氮菌肥三份,每份2000g,精確到001g,放入已稱恒重的鋁盒中。置105干燥箱內烘烤4h,移至干燥器內,冷卻后稱重。根據烘干前后質量差按式(1)計算含水量。取三個樣品測定數的平均值。平行樣品絕對偏差應低于1%。

          含水量(m

            %)=0-m1

            m100…………………………(1)

            0

            式中m0———烘干前樣品質量,g;

            m1———烘干后樣品質量,g。

            725吸附劑顆粒細度測定

            稱樣1000g

           。ň_至001g),置于標準篩中(直徑分別為018mm或015mm),用水沖洗,用毛筆輕刷,至粉末不再通過為止。將篩余物置105!110溫度下烘干,稱重。篩余物百分含量按式(2)計算:

            篩余物(%)=篩余物量(1-樣品含水量百分數)

            樣品質量100…………(2)

            726有效活菌數和雜菌含量測定

            采用平板計數法測定有效活菌數及雜菌率。

            7261測定步驟

            采樣應不少于500g,從中稱取1000g,加入帶玻璃珠的100mL的無菌水中(液體菌劑取10mL,加入90mL的無菌水中),靜置20min后在旋轉式搖床上200r/min充分振蕩

            30min,即成母液的菌懸液。

            用無菌吸管吸取5mL上述母液的菌懸液加入45mL無菌水中,混勻成110稀釋的菌懸液,這樣依次稀釋,分別得到11102,11103,11104,11105等濃度(每個稀釋度必須更換無菌吸管)。

            用05mL無菌吸管分別吸取不同稀釋度菌懸液01mL,加至直徑為9cm平皿的選擇培養基(見附錄A)表面,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻地涂于瓊脂表面,或取1mL不同稀釋度菌懸液加入培養皿內,與瓊脂培養基混勻,每個樣品取3個連續適宜稀釋度,每一稀釋度重復3次,同時加無菌水的空白對照。28培養2!3d后每個稀釋度取5!10個菌落的菌體,涂片染色(見附錄B)。顯微鏡觀察識別后,選一個適宜稀釋度(菌落在30!300個之間的平板),計算出同一稀釋度三個平皿上菌落平均數。

            雜菌數是指在選擇培養基上,除有效活菌外的其他菌的菌落數與馬丁培養基上霉菌數之和。馬丁培養基10-4稀釋度菌懸液加樣,操作步驟同樣品有效活菌數檢測操作。

            7262允許差

            平行樣品誤差按式(3)計算,并應符合表2的規定。

            *=%(x--x)

            (n-1…………………………………(3)

            式中*———單一標準差;

            x———同一個稀釋度任一個平板測定值;

            -x———同一個稀釋度平板測定的平均值;

            n———重復次數。

            表2平板上菌落數對應的單—標準差

            平板上菌落數,個/皿30!5051!99100!300

            單一標準差,100200500

            7263測定結果的計算

            按式(4)、式(5)計算樣品的有效活菌數及雜菌率

            有效活菌數(個/g)=菌落平均數稀釋倍數母液菌懸液的體積(mL)

            菌劑克數或毫升數

            1

            加樣量(mL)……………………………………………………………………………(4)

            雜菌率(%)=雜菌數

            有效菌數+雜菌數100……………………(5)

            727有效期檢驗在產品說明書標明的有效期到達前10d測定擾品各項指標,方法同721!726。

            8檢驗規則

            81檢驗分類

            811產品出廠檢驗

            產品交貨時進行的檢驗。

            812產品型式檢驗

            新產品鑒定或國家質檢機構質量監督檢驗。

            82檢驗項目

            型式檢驗的檢驗項目按52要求進行。出廠檢驗不檢有效期。

            83判定規則

            831合格產品:

            a)檢驗結果符合52所規定的技術指標的產品為合格產品;

            b)產品有效活菌數符合指標,雜菌率不符合指標,但小于本標準規定的兩倍時(液體10%、固體30%、凍干瓶4%),而且在馬丁培養基平板上霉菌數小于30105,其他指標有一項不符合,也可判為合格產品;

            C產品有效活菌數及雜菌率符合指標,在水分、外觀、pH值、細度等次要檢測項目中,有3項不符合技術指標,也判為合格產品。

            832不合格產品

            a)產品有效活菌數不符合技術指標或投入菌種沒有完全相應的檢驗出,判為不合格產品;

            b)產品雜菌率超過本標準規定的兩倍(液體10%、固體30%、凍干瓶4%),判為不合格產品;

            c)產品有效活菌數符合指標,雜菌率不符合指標,但小于本標準規定的兩倍時C液體10%、固體30%、凍干瓶4%),其他指標有兩項不符合指標,判為不合格產品;

            d)產品檢驗在馬丁培養基平板上霉菌數#30105,判為不合格產品;

            e)產品水分、pH值、細度、外觀等次要檢測項目中,有4項不符合技術指標,判為不合格產品。

            833含有植物促生根際細菌(PGPR)的固氮菌肥料產品檢測時,只測固氮菌數量,不測

            植物促生根際細菌的數量,也不視其為雜菌。

            834本標準中質量指標合格判斷,采用GB/T1250中修約值比較。

            9包裝、標識、運輸和貯存

            91包裝

            911內包裝

            液體肥料小包裝用塑料瓶或玻璃瓶,大包裝用塑料桶。固體肥料用不透明聚乙烯塑料袋包裝。凍干菌劑用玻璃指形管真空干燥。

            912外包裝

            外包裝采用紙箱,紙箱質量應符合GB/T6543的要求。箱外用尼龍打包帶加固。

            913每箱(袋)產品中附有產品合格證和使用說明書,在使用說明中標明使用方法、用量及注意事項。

            92標識

            在包裝箱(袋)上印有產品名稱、商標、標準編號、肥料登記證號、生產單位、廠址、生產日期、批號和凈重,并印有防曬、防潮、防凍等標記,若有必要還要加印易碎、防倒置等標記。內包裝上有產品名稱、商標、標準編號、肥料登記證號、有效菌含量、生產日期、有效期、產品性能、使用說明書及生產單位、廠址等。

            93運輸

            適用于常用運輸工具,運輸過程中有遮蓋物,防止雨淋、日曬及35以上高溫。氣溫低于0時采取保溫措施,防止菌肥凍冰。運輸過程中輕裝輕卸,避免包裝破損。

            94貯存

            產品貯存在陰涼、干燥、通風的庫房內,最適溫度為10!25,不得露天堆放,以防雨淋和日曬,避免凍冰及長時間35以上高溫。

            以上高溫。

            附錄A

           。藴实母戒洠

            有效活菌數和雜菌(霉菌)測定的選擇培養基

            A1固氮菌用阿須貝氏(Ashby)培養基

            磷酸二氫鉀(KH2PO4)02g

            硫酸鎂(MgSO4·7H2O)02g

            氯化鈉(NaCl)02g

            碳酸鈣(CaCO3)50g

            甘露醇(CsH14O6)100g

            硫酸鈣(CaSO4·2H2O)01g

            pH70

            A2固氮(莖瘤)根瘤菌培養基

            乳酸鈉(C3H3O3Na)100g

            磷酸氫二鉀(K2HPO4)167g

            磷酸二氫鉀(KH2PO4)087g

            氯化鈉(NaCl)005g

            氯化鈣(CaCl2)004g

            氯化鐵(FeCl3)0004g

            硫酸鎂(MgSO4·7H2O)01g

            酵母膏10g

           。ɑ蚪湍阜08g)

            pH68

            A3聯合固氮菌培養基

            D-葡萄糖酸鈉(C6H11O7Na)50g

            磷酸二氫鉀(KH2PO4)04g

            磷酸氫二鉀(K2HPO4)01g

            硫酸鎂(MgSO4·7H2O)02g

            酵母膏10g

           。ɑ蚪湍阜08g)

            氯化鈉(NaCl)01g

            氯化鈣(CaCl2)002g

            氯化鐵(FeCl3)001g

            鉬酸鈉(Na2MoO4)0002g

            pH68!70

            A4馬丁培養基(測霉菌數)

            磷酸氫二鉀(K2HPO4)10g

            硫酸鎂(MgSO4·7H2O)05g

            葡萄糖(C6H12O6·H2O)100g

            蛋白胨50g

            1%孟加拉紅水溶液〔四氯四碘熒光素

           。–20H4ClI

            44O5)〕33mL

            每升培養基中加入01g氯霉素,一起滅菌。

            注以上各培養基需蒸餾水1000mL,瓊脂18!20g

            附錄B

           。藴实母戒洠

            染色劑和染色方法

            B1莢膜染色法

            B11染色劑

            石碳酸復紅染色液

            甲液:堿性復紅(Basicfuchsin)

           。–20H20ClN3)03g

            95%酒精(CH3CH2OH)100mL

            乙液:石碳酸(C6H5OH)50g

            蒸餾水950mL

            a)將堿性復紅在研缽中研磨后,逐漸加入95%酒精,繼續研磨使之溶解,配成甲液。

            b)將石碳酸溶解在蒸餾水中配成乙液。

            c)把甲液和乙液混合搖勻,成為石碳酸復紅,通?蓪⒒旌弦合♂5!10倍使用。

            稀釋液易變質失效,一次不宜多配。

            B12染色方法

            B121取少量培養菌涂于載玻片水滴中,涂成薄層。

            B122自然干燥或稍加熱。

            B123在石碳酸復紅染1min后,水洗,干后鏡檢。

            B13染色結果

            菌體為紅色,菌體周圍有一層透明圈即為莢膜。

            B2芽胞染色法

            B21染色劑

            B2115%孔雀綠

            孔雀綠(C23H25ClN2)50g

            蒸餾水100mL

            B212005%堿性復紅

            堿性復紅(C20H20ClN3)05g

            95%酒精100mL

            B22染色方法

            B221制片。

            B222加孔雀綠染液3!5滴于涂片處,酒精燈火焰加熱至冒汽,但不沸騰,并隨時補加

            染液,維持涂片處不干,染色約5!10min。

            B223自來水沖洗30s。

            B224用005%堿性復紅染色1min,水洗,鏡檢(若005%堿性復紅濃度太高,可根據

            具體情況適當稀釋)。

            B23染色結果

            芽胞綠色,菌體紅色。

            B3革蘭氏染色法

            B31染色劑

            B311結晶紫染色液

            甲液結晶紫(C25H30ClN3·9H2O)20g

            乙醇(95%)

           。–H3CH2OH)20mL

            乙液:草酸銨〔(NH4)2C2O4·H2O〕08g

            蒸餾水80mL

            甲、乙液相混,靜置48h后使用。

            B312盧哥(Lugol)氏碘液

            碘(I2)片10g

            碘化鉀(KI)20g

            蒸餾水300mL

            先用少量(3!5mL)蒸餾水溶解碘化鉀,再投入碘片,待碘全溶后,加水100mL,配成母

            液,使用時加兩倍水,稀釋成盧哥氏碘液。

            B313脫色液:95%乙醇。

            B314復染液:05%的番紅水溶液

            25%番紅酒精溶液10mL

            蒸餾水100mL

            B32染色方法

            B321制片。

            B322滴加結晶紫液,覆蓋1min。

            B323用水沖凈結晶紫液。

            B324滴加碘液沖去殘水,并覆蓋1min。

            B325用水沖去碘液,用吸水紙吸去水分。

            B326加95%酒精數滴,并輕輕搖動進行脫色,30s后水洗,吸去水分。

            B327番紅染色液染10s后,自來水沖洗。干燥,鏡檢。

            B33染色結果

            革蘭氏正反應菌體呈紫色,負反應菌體呈紅色。

            B4鞭毛染色

            B41染色劑

            甲液:丹寧酸(C76H52O46)50g

            氯化鐵(FeCl3)15g

            甲醛(15%)

           。℉CHO)20mL

            氫氧化鈉(NaOH)

           。1%)10mL

            蒸餾水100mL

            乙液:硝酸銀(AgNO3)2g

            蒸餾水100mL

            待硝酸銀溶解后,取出10mL備用,其余的90mL硝酸銀液中滴加濃氫氧化銨,則形成很濃厚的沉淀,再繼續滴加氫氧化銨到剛剛溶解沉淀成為澄清溶液為止。再將備用的硝酸銀慢慢滴人,則出現薄霧,但輕輕搖動后,薄霧狀的沉淀又消失,再滴入硝酸銀,直到搖動后,仍呈現輕微而穩定的薄霧狀沉淀為止(如霧重,則銀鹽沉淀出,不宜使用)。

            B42染色方法

            421涂片:在載玻片的一端滴一滴蒸餾水,用接種環挑取斜面上少許菌苔,在載玻片的水滴中輕蘸幾下。將玻片稍傾斜,使菌液隨水滴緩慢流到另一端,然后平放在空氣中干燥B422涂片干燥后,滴加甲液染3!5min,用蒸餾水沖洗。加乙液染30!60s,并在酒精燈上加熱,使其稍冒蒸氣而染液不干,然后用蒸餾水沖洗,干后鏡檢。

            B43染色結果

            菌體為深褐色,鞭毛為褐色。

            附錄C

           。藴实母戒洠

            菌種固氮效能測定方法

            在500mL三角瓶中加入100mL無氮培養基(含糖1%即1g),121滅菌30min。無菌操作,每瓶接入兩環待測菌種(或1mL培養3d的培養液),放置搖床上振蕩(120r/min)

            30培養5!7d后,取出定糖測氮。

            定糖采用蒽酮光電比色法。

            測氮采用半微量光電比色法。

            C1蒽酮光電比色法

            C11測定原理

            糖類遇硫酸即脫水成為醛類,再變成呋喃衍生物,后者與蒽酮縮合,生成藍綠色化合物。于580!650nm處進行比色測定(蒽酮可與單糖、雙糖、淀粉、糊精等反應),該方法適

            合于含糖量0003%以上的樣品。

            C12試劑和儀器

            分析中除有說明外,限用分析純試劑和GB/T6682中規定的三級水。

            C121硫酸。

            C12202%(m/V)蒽酮溶液:稱取02g蒽酮于100mL硫酸中。充分攪拌,使其溶解。

            該溶液不穩定,應當天配用。

            C123葡萄糖標準液:準確稱取葡萄糖1000g,溶于水中,定容至1000mL,即為

            1000mg/mL標準液。

            C124分光光度計。

            C13分析步驟

            C131試樣處理

            取發酵培養的菌液100!400mL(取決于含糖量),稀釋至10000ml,取此稀釋液100mL于比色管中,加水至200mL,每管加入蒽酮試劑400mL,搖勻,水浴加熱15min,使之充分顯色,冷卻后,于580!650nm處進行比色測定,記錄吸光度,同時進行空白試驗。

            C132標準曲線繪制

            吸取葡萄糖標準溶液100、200、400、600、800、1000、2000mL。于100mL容量瓶

            中,加水至刻度,該液分別含糖10、20、40、60、80、100、200%g/mL。

            吸取1.00mL放入比色管中,加水至2.00mL,按C1.3.1方法測定,記錄吸光度用標準系列的含糖量定義橫坐標,吸光度為縱坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

            C14分析結果的計算

            100mL溶液的含糖量(X)按式(C1)計算:

            X=(m1-m2)100

            m10010-6…………………………(1)

            式中:m1———標準曲線上查出的試驗含糖量,%g/mL;

            m2———標準曲線上查出的空白試驗的含糖量,%g/mL;

            m———吸取發酵溶液體積,mL。

            C15允許差

            a)取平行測定的算術平均值為測定結果;

            b)平行測定結果的允許差不大于0005g/100mL。

            C2固氮菌液全氮比色測定法

            C21測定原理

            在硫酸銅或硫酸鉀存在下,濃硫酸中加入菌液,并加熱使試樣全部有機氮轉化為氨態氮,與奈氏試劑反應,于波長420nm處進行比色測定。

            C22試劑和儀器

            分析中除非另有說明,限用分析純試劑和GB/T6682中規定的三級水。

            C221硫酸(GB/T625)。
          C222雙氧水

            C223氫氧化鈉(GB/T629)2mol/L溶液:稱量8g氫氧化鈉溶于水中,定容至100mL。

            C22440%(m/V)氫氧化鈉(GB/T629)溶液:稱取40g氫氧化鈉溶于100mL。水中。

            C22550%(m/V)酒石酸鉀鈉溶液:50g酒石酸鉀鈉溶于100mL水中。

            C226奈氏試劑:71g碘化鉀,10g碘化汞(HgI2)溶于少量水中,另配16g氫氧化鈉溶于

            70mL水中,冷卻后將前一溶液緩緩倒入氫氧化鈉溶液中,邊加邊攪拌,最后用水稀釋至100mL,靜置過夜,取清液儲于棕色瓶中。

            C227催化劑:1000g硫酸鉀與100g硫酸銅共同研磨均勻,儲于廣口瓶中。

            C228分光光度計。

            C23分析步驟

            C231試樣制備和測試

            吸取固氮菌液100mL于30mL消化管中,加硫酸(C221)3mL,加01g催化劑(C227)和5滴雙氧水(C222)消煮至清亮,若反應液久煮不清,可冷卻后加1!2滴雙氧水(C222),繼續煮至無色透明,取下冷卻。加少許蒸餾水,搖勻,滴加40%氫氧化鈉至出現氫氧化銅沉淀(約11!12mL),加酒石酸鉀鈉(C225)20滴,以去除氫氧化物沉淀掩蔽鈣鎂,將試管液全部轉移至100mL容量瓶中,消化管洗滌液一并倒入容量瓶,稀釋至刻度,搖勻。過濾,濾液1000mL于比色管中,加氫氧化鈉(C223)100mL,加酒石酸鉀鈉100mL,加奈氏試劑3mL,搖勻,顯色2!3min后,即倒入比色杯中,于420nm處比色計測定。讀取吸光度。

            C232標準曲線的繪制

            準確稱取在(1055)烘1h直至恒重的優級純試劑硫酸銨04716g,溶于水,稀釋至

            100mL,該液含氮1mg/mL,取此液005、010、025、050、100、200mL。放入100mL容量瓶,用水稀釋至刻度,其含氮分別為050、100、250、500、1000、2000/%g/mL,取標準液各1mL放入比色管中,加水至2mL,按C131方法測定,記錄吸光度。

            用標準液的氮含量為橫坐標,相應的吸光度為縱坐標,繪制工作曲線。

            C24分析結果的計算

            氮(X)含量以g/100mL表示,按式(C2)計算

            X=(m1-m2)1000

            m10010-6………………………(C2)

            式中m1———標準曲線上查出的試驗含氮量,%g/mL;

            m2———標準曲線上查出的空白試驗氮含量,%g/mL;

            m———吸取發酵溶液體積,mL。

            C25允許差

            a)取平行測定和算術平均值為測定結果;

            b)平行測定結果的允許差不大于0005g。

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